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本试剂盒可用于普通PCR、RT-PCR、RAPD、PCR测序、RACE、DD-PCR以及其它PCR相关的实验室工作。PCR反应混合物的配制可在几分钟之内完成。

影响PCR反应的因素很多，如果发现PCR反应没有得所需产物或条带较弱，建议可用试剂盒中提供的25mMMgCl₂调节反应体系中的Mg²⁺浓度，以期获得更好的结果。

• PCR能够从少量分子开始获得超过1千万拷贝数的目标DNA序列。其敏感性要求模板不能被环境中其他DNA或扩增产物所污染。
  
• DNA模板的准备，反应混合物的调配，PCR反应过程以及随后的产物分析都应分开操作。
  
• 建议使用带有紫外灯的超净台来混合反应混合物。每一步PCR操作都应该使用新的手套。
  
• 要求PCR反应所需试剂分开配制并仅用于此目的。
  
• 溶液应分装保存在指定存放PCR试剂的地方。试剂应该与其他DNA模板分开存放。
  
• 为了确定无污染，应该同时做一个不含DNA模板的标准反应。
  
• 5×PCR Buffer含有DNA指示剂和增加比重的混合物，在PCR反应结束后能够直接上样进行电泳检测，节省您的实验时间并避免交叉污染的可能。

• 模板DNA准备：基因组DNA，反应体系中模板浓度推荐范围1～10μg/mL；质粒或噬菌体DNA浓度0.1～1ng/mL。
  
• 引物准备：引物浓度推荐范围0.05～1μM。
  
• 在无菌洁净的PCR管中，参考下面体系配制反应溶液。
  

  成分	终浓度	用量
  Sterilized ddH2O	-	补足至50μL
  5×PCR Buffer	1×	10μL
  dNTP Mix	0.2mM	5μL
  Primer 1	0.1～1μM	x μL
  Primer 2	0.1～1μM	x μL
  Taq DNA Polymerase	2.5U	x μL
  MgCl2	1～4mM	x μL
  模板DNA	10pg～1μg	x μL

• 50μL体系中不同浓度Mg²⁺所需MgCl₂溶液的体积：
  

  Mg2+终浓度(mM)	1	1.5	2	2.5	3	4
  MgCl2的体积(μL)	2	3	4	5	6	8

• 轻轻混匀后短暂离心。
  
  • 在同时进行几个平行反应时，将原本单独分装在各个离心管中的反应物，在一个离心管中混合均匀再分装到各PCR管中，再依次加入MgCl₂和模板DNA，可大大减少错误率，并节约了大量试剂转移所需的时间。
• 加适量的矿物油后，置于PCR仪中进行反应。
  
  • 对于有热盖的PCR仪可不加矿物油。
• PCR结束后，产物可直接上样进行电泳。